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mtt实验步骤 🧪🔬

导读 在进行MTT实验时,确保所有材料和设备都已准备好是非常重要的。下面是一份详细的实验步骤指南,帮助你顺利完成实验。实验准备首先,确认所...

在进行MTT实验时,确保所有材料和设备都已准备好是非常重要的。下面是一份详细的实验步骤指南,帮助你顺利完成实验。

实验准备

首先,确认所需的所有化学试剂和设备都已经准备就绪。这包括但不限于MTT溶液、细胞培养基、96孔板以及其他必要的实验室工具。确保所有物品都是干净且无污染的,以保证实验结果的准确性。

细胞接种

将适量的细胞悬液加入到96孔板中,每孔加入大约100微升的细胞悬液。确保每个孔中的细胞数量一致,以便于后续数据的对比分析。放置于培养箱中,按照常规条件进行培养,通常为37°C,5% CO₂环境下培养24小时。

加入MTT溶液

在培养24小时后,小心地移除培养基,然后向每个孔中加入10微升的MTT溶液(通常是5mg/mL)。轻轻摇晃96孔板,使MTT溶液均匀分布。然后将其放回培养箱继续孵育4小时。

溶解甲瓒

孵育完成后,小心地移除上清液,并加入100微升的DMSO或其他适当的溶剂来溶解形成的甲瓒晶体。用移液枪轻轻混匀,确保所有的甲瓒都被充分溶解。

测定吸光度

最后,使用酶标仪测定每个孔的吸光度值。通常选择570nm波长作为检测波长。记录下每个样本的吸光度值,用于后续的数据分析和处理。

通过遵循上述步骤,你可以有效地完成MTT实验,并获得可靠的实验结果。记得在整个过程中保持操作的细致与精确,以确保实验的成功。

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